ВПЛИВ РЕЧОВИН-СТЕРИЛЯНТІВ НА ДЕКОНТАМІНАЦІЮ ЕКСПЛАНТІВ PINUS SYLVESTRIS L. В КУЛЬТУРІ IN VITRO

Анотація

Проведено аналіз та узагальнення літературних даних, як вітчизняних, так і іноземних вчених, які стосуються досягнень у сфері мікроклонального розмноження в культурі in vitro рослин Pinus sylvestris L., зокрема процесу деконтамінації вихідних експлантів. Виконано дослідження впливу концентрації хімічних агентів-стерилянтів, а також тривалості обробітку (експозиції) ними на стерилізацію вихідних експлантів досліджуваного виду. Детально охарактеризовано використану методику проведення експериментальних досліджень по отриманню асептичної культури експлантів Pinus sylvestris L. для подальшого розмноження їх in vitro. Проведено тестування ступінчастої схеми деконтамінації рослинного матеріалу, яка проходила у два основні етапи: первинна та модифікована стерилізація. Перший етап полягав у обробітку експлантів наступним чином: протічна вода із відповідним детергентом («Твін 80»), пероксид водню (Н2О2) (1; 2; 3% та 3; 5; 10 хвилин), етиловий спирт (С2Н5ОН) (50; 70; 96% та 5; 10; 15 секунд) у наведених концентраціях та експозиціях. Модифікацію первинної схеми деконтамінації експлантів виконували із використанням таких основних хімічних речовин: NaClO (10; 20; 30% та 3; 5; 7 хвилин), AgNO3 (0,1; 0,2; 0,3% та 5; 10; 15 хвилин) та  HgCl2 (1; 2; 3% та 5; 10; 15 хвилин). Щоб запобігти розвитку внутрішніх інфекцій, застосовували 0,1% антибіотик «Іманін». Виконано дослідження конкретного окремого впливу основних хімічних агентів-стерилянтів на ефективність стерилізації та життєздатність експлантів Pinus sylvestris L. Експериментально встановлено оптимальну ступінчасту схему деконтамінації експлантів досліджуваного виду, яка забезпечила ефективність стерилізації 94,33±1,41% та життєздатність експлантів  91,7±1,34% і полягала у почерговому обробітку рослинного матеріалу наступним чином: С2Н5ОН (96%; 10 с) + Н2О з детергентом (6 год) + Н2О2 (3%; 10 хвилин) + С2Н5ОН (70%; 10 с) + AgNO3 (0,2%; 5 хвилин) + NaClO (30%; 5 хвилин).